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讓我們一起來(lái)看看透析袋的選擇

發(fā)布時(shí)間: 2022-12-27  點(diǎn)擊次數: 4310次
  讓我們一起來(lái)看看透析袋的選擇
  1)選擇合適的截留分子量。
  截留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25。選擇截留分子量的經(jīng)驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
  分子量差超過(guò)100倍時(shí),可以同時(shí)保證高收率和高純度。
  當分子量差10倍時(shí),為了追求高收率,可以選擇較低的截留分子量;為了追求高純度,可以選擇較高的截留分子量。如產(chǎn)品(Cyt C,20KD)和雜質(zhì)(Vit B12,2KD),側重收率,選擇截留分子是產(chǎn)品分子量的80%-100%及提高收率,用截留分子量20KD的膜去分離Cyt C和Vit B12可得到約88%左右的收率,但仍含有12%左右的雜質(zhì)。側重純度但犧牲收率,選用截留分子量高一些膜,樣品保留率在50%-80%左右,用截留分子量為50KD的膜去分離Cyt C和Vit B12以達到收率76%左右和約有2%的B12存留。
  對于需對幾種分子進(jìn)行分離的應用,分子之間的分子量差至少為5倍,才能完成有效的膜透析。若不能滿(mǎn)足分子量差的要求,可能需要使用其它的分離技術(shù),如色譜方法或切向流過(guò)濾。
  2)選擇適當的扁平寬度(體積)
  透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長(cháng)透析較慢。為易于使用,建議使用總長(cháng)(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15cm的透析袋。
  3)選擇適合的透析膜材質(zhì)
  每種膜對不同的分子具有不同的親和性。對于球蛋白,相對的結合親和性由低到高為CE<RC<PVDF。
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